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Parassiti e vettori volume 16, numero articolo: 299 (2023) Citare questo articolo

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Sei specie di parassiti apicomplexa del genere Babesia, vale a dire B. microti, B. divergens, B. duncani, B. motasi, B. crassa-like e B. venatorum, sono considerati i principali agenti causali della babesiosi umana nelle popolazioni endemiche. le zone. Queste sei specie possiedono gradi variabili di virulenza per i loro ospiti primari. Pertanto, l’identificazione accurata di queste specie è fondamentale per l’adozione di strategie terapeutiche adeguate.

Abbiamo sviluppato un approccio PCR in tempo reale con fusione ad alta risoluzione (qPCR-HRM) mirato al gene dell'RNA ribosomiale 18S di cinque Babesia spp. sulla base della temperatura di fusione (Tm) e dei valori percentuali di confidenza del genotipo. Questo approccio è stato poi valutato utilizzando 429 campioni di sangue raccolti da pazienti con una storia di punture di zecca, 120 campioni di DNA mescolati con plasmidi e 80 campioni di animali infetti da laboratorio.

La sensibilità e la specificità del metodo qPCR-HRM proposto erano rispettivamente del 95% e del 100% e il limite di rilevamento era di 1–100 copie del plasmide con il gene bersaglio clonato. Il livello di rilevamento dipendeva dalle specie di Babesia analizzate. I primer progettati in questo studio hanno garantito non solo l'elevata specificità interspecifica del metodo proposto, ma anche un'elevata versatilità per diversi isolati della stessa specie in tutto il mondo. Inoltre, la Tm ottenuta dallo standard plasmidico preparato è teoricamente adatta per identificare gli isolati di tutte le sequenze conosciute delle cinque specie Babesia.

Il metodo di rilevamento sviluppato fornisce uno strumento utile per l'indagine epidemiologica della babesiosi umana e per lo screening pre-trasfusionale.

La babesiosi umana causata dalle specie Babesia, che sono protozoi sanguigni appartenenti alla famiglia Babesiidae (ordine Piroplasmida; Phylum Apicomplexa) [1], è una malattia riemergente trasmessa dalle zecche. I casi di infezione da Babesia trasmessa per trasfusione e acquisita naturalmente nell’uomo rappresentano un grave problema di salute pubblica e sono stati frequentemente segnalati in tutto il mondo negli ultimi anni [2, 3]. Gli agenti patogeni responsabili della babesiosi umana vengono trasmessi prevalentemente attraverso punture di zecca e trasfusioni di sangue e raramente attraverso vie perinatali e trapianti di organi [4,5,6,7,8]. Ad oggi sono state identificate più di 100 specie di Babesia in tutto il mondo [9].

Babesia spp. in precedenza si credeva che infettassero solo gli animali selvatici e domestici. Tuttavia, nel 1957, il primo caso di infezione umana da Babesia fu segnalato in Jugoslavia [10] e la malattia è gradualmente diventata una nuova malattia parassitaria globale negli esseri umani, con il potenziale di costituire una minaccia per la salute delle persone con un sistema immunitario più debole. Sei specie di Babesia, vale a dire B. microti, B. venatorum, B. divergens, B. duncani, B. motasi e B. crassa-like, sono ben note come i principali agenti patogeni responsabili della babesiosi umana [11, 12]. La maggior parte dei casi di Babesia negli Stati Uniti sono causati da B. microti, nelle aree in cui la malattia è endemica, ma anche B. duncani e B. divergens sono distribuiti negli Stati Uniti [13]. In Europa, B. divergens si trova principalmente in Francia e Irlanda [12, 14], B. venatorum è stato segnalato in Austria, Germania, Italia e Svezia [14,15,16] e sono state segnalate infezioni simili a B. crassa in Slovenia e Francia [17, 18]. In Asia, B. venatorum e B. crassa simili sono segnalati principalmente in Cina [19, 20]. Tuttavia, casi di B. microti sono stati segnalati nella Cina sudoccidentale lungo il confine con Myanmar, Taiwan e Giappone [21,22,23,24,25]. Il ceppo Babesia motasi KO1 (DQ3466955) è distribuito in Corea [12, 26]. Le sequenze di B. motasi KO1 e Babesia sp. I ceppi KCDC-1 (MK930513) isolati da due casi umani in Corea del Sud hanno mostrato una grande somiglianza con la sequenza del ceppo B. motasi hebeiensis in Cina [26]. È stato inoltre osservato che B. duncani, segnalato per la prima volta nello Stato di Washington, USA, è ora prevalente in Canada [27,28,29].